Hur man utför en Allium Cepa Test

lök ( Allium cepa ) används för att bedöma miljörisker genom att utveckla rötter för att komma i kontakt med ämnen som ska testas . Efter tillräcklig exponering , är rötterna tas bort , färgas och urlakade så att cell kromosomer kan ses under ett ljusmikroskop . Toxicitet bevisas om kromosomavvikelser eller celldelning avvikelser upptäcks . Root tips används eftersom cellerna finns det aktivt växande och dividera , vilket ger en bra möjlighet att se kromosomer under olika stadier av celluppdelning. Detta är vad du behöver
lök
Knife
Vatten
bägare eller andra behållare för att hålla vätskor och lök
Test vätskor
rakblad eller skalpell
Flaskor
Aceto - alkohol fixativ
objektglas
täckglas
Saltsyra
Rostfri lakning stång
Carbol fuksin fläck
Aceto - orcein fläck
Ättiksyra
Kanada balsam
ljusmikroskop
Kamera fäste för mikroskop
Visa fler Instruktioner
Ställa in test
1

Ta bort den yttre torr hud på 12 lök . Skrapa ner på löken runt bottenplåtarna utan att skada området från vilket rötterna kommer att växa fram .
2

Välj bägare som har en mun tillräckligt bred för att hålla botten av löken nedsänkta i testet vätskor. Fyll bägarna med destillerat vatten och placera lök i bägarna i kontakt med vattnet. Skydda sidorna av bägarna med aluminiumfolie för att simulera jordiska mörker . Byt vatten varje dag . Addera 3

Undersök lök baser efter två dagar . Rötter borde ha bildats . Utvärdera rottillväxt och kassera de två lök med den svagaste rottillväxt .
4

Ställ in en andra serie av fem bägare som vardera innehåller ett prov av det material som skall testas , t.ex. avloppsvatten eller industri avrinning . Sätt fem av löken i dessa bägare . Behåll de övriga fem i destillerat vatten som testkontroller. Låt rötterna att växa i ytterligare 24 timmar .
Förbereda Roots
5

Med en skalpell eller rakblad , skörd 05:55 rotspetsar från varje lök , inspelning som var kontroller och som var försökspersoner . Håll rötter från enskilda lök separat i små märkta flaskor .
6

Fix rotspetsar omedelbart i aceto - alkohol i ett 01:03 -förhållande . Placera de grundläggande tips för en lök på ett objektglas och blöta upp dem i 1 N saltsyra, vilket är detsamma som en molar saltsyra, vid 60 grader Celsius under tre minuter. Fläck urlakade tips med Carbol fuksin fläck , en blandning av fenol och basisk fuchsin som binder till element i cellväggarna så att de blir mer synliga under ljusmikroskop .
7

Lägg 2 procent aceto - orcein fläck i 4 procent ättiksyra. Detta färgar kromosomerna . Rör med lakats stången. Applicera ett täckglas , trycka ner det till squash roten tips . Antingen försegla kanterna med snabbtorkande nagellack eller permanent montera förberedelserna i Kanada balsam , kåda från balsamgran träd blandat med antingen eteriska oljor eller xylen . Antal bilderna så resultaten kommer att spelas in , men inte uppenbart om var och en är en försöksperson eller en kontroll .

Inspelningsresultat
8

Placera objektglas på scenen av ett ljusmikroskop. Undersök fältet under lägre förstoring , byta till större förstoring för att undersöka kromosomer .
9

Spela in kromosomavvikelser på ett datablad , registrering av uppgifter från den kodade nummer för varje lök . Inkludera ofullständigt separerade eller trasiga kromosomer , mikrokärnor ( extra kärnor som bildas i slutet av celldelning som kan innehålla kromosomala skräp ) , kromosom ringar och kladdiga och störda kromosomer i olika stadier av celldelning . Fotografera varje bild .
10

Analysera data med hjälp av statistisk analys . Tolka resultaten för att bedöma om provlösningen är genotoxiskt . Addera