1. Home
  2. alternativ medicin
  3. biter Stings
  4. Cancer
  5. förhållanden Behandlingar
  6. Tandhälsa
  7. Diet Nutrition
  8. Family Health
  9. Sjukvård Industri
  10. Mental hälsa
  11. Folkhälsa säkerhet
  12. Verksamheten Verksamheten

MBP- reningsprotokoll

MBP eller maltosbindande protein hittas i bakterier Escherichia coli, som är en del av tarmfloran hos människor och djur. Reningen av MBP involverar en rad förfaranden som syftar till att separera proteinets beståndsdelar . I molekylärbiologi , är MBP rening en viktig process för att studera struktur och funktion av detta protein . MBP reningsprotokollinkluderar MBP smälta proteiner rening , småskalig MBP - fusion och maltos bindande protein fusion tag rening . MBP- fuserade proteiner Rening

Under detta protokoll , tekniker tvätta 20 ml av polymer amylosharts med atris lösning vid pH 7,4 , natriumklorid, merkaptoetanol (ME) och etylendiamintetraättiksyra (EDTA ) , i enlighet med protokollen Online . Cellprover tillsättes , centrifugerades och analyserades med gelelektrofores. Proverna analyseras också i ett chromatographer , där tekniker eluat eller observera lösningens väljare medan det passerar genom kromatografi .
Småskalig MBP - fusions Protein Purification

Enligt hebreiska universitetet i Jerusalem , biologer använder reagens isopropyl BD- 1 - tiogalaktopyranosid ( IPTG ) , spinn cellodling under 10 min vid 8000 varv per minut vid 39,2 grader Fahrenheit . Senare , de tar bort överstående vätskan och blanda kall PBS-buffert till provet , som är uppdelad i flera rör och centrifugeras på nytt . Proven hölls sedan vid -112 grader Fahrenheit för bakre analys . Addera maltosbindningsprotein Fusion Tag Purification

Affinity taggar är genetiskt manipulerade molekyler som används i molekylärbiologi för att detektera och rena proteiner . Detta protokoll är en komplex uppsättning förfaranden uppdelad i tre etapper , som omfattar byggandet av polyhistidin proteinmarkör( HisMBP ) ; ett pilotexperimentför att utvärdera lösligheten av proteinet; och storskalig rening av MBP molekyler , enligt Nature protokoll . Bortsett från E. coli- prover , tekniker använda ampicillin , kanamycin , IPTG , anhydrotetracyklin , glukosmonohydrat , cellysbuffert , DNA-polymeras , PCR- primers , Tris - acetat - EDTA och etidiumbromid . Addera

SHARE

Upphovsrätt © Hälsa och Sjukdom