En kommersiell förening för att främja separation placeras i varje 50 ml centrifugrör och rören centrifugeras i trettio sekunder. Caps blod rör besprutas med alkohol innan öppning, sedan antikoagulantia-behandlat helblod överförs sedan via pipett in i centrifugrör. Plasman lagret av blodet aspireras med en pipett.
Frysning
Cellerna från föregående steg sedan kommer att centrifugeras med buffrad saltlösning tre gånger. Efter ett celltal, kommer prover centrifugeras därefter suspenderas i frysmedium. Prover i frysmedium är nästa delas mellan cryovials i en ml mängder. Injektionsflaskorna förvarats över natten i en
-70 º C frys och flyttade till långtidslagring i flytande kväve nästa dag.
Säkert tina
Kryorör överförs från flytande kväve till ett 37 º C vattenbad och provet ska tinas en till två minuter. En varm transport mediet läggs till varje flaska. Utspädd cellsuspensionen centrifugeras under sju minuter. Antalet och cellviabiliteten kontrolleras, Om celler behöver koncentrera sig, är proverna centrifugeras sju minuter. Provet späds till brukslösning och vilade i tolv till arton timmar innan undersökningen i det angivna protokollet
Referenser
Biomed Central:. Protokoll för isolering , frysförvaring och upptining av PBMC
nätverk för givare bukspottkörtel orgel med Diabetes: Isolering av perifera mononukleära blodceller (PBMC)
Resources
Los Almos National Labs: antikroppsanalys i PBMC
forskares Solutions: Isolera lymfocyter från helblod.
Upphovsrätt © Liv och hälsa