Slå på spektrofotometer och ställ in den på en våglängd på 620 nm . Låt instrumentet värmas upp i minst 10 minuter så att svaret kommer att vara stabil under experimentet .
2
Ställ ut sex provrör , märka dem 1-6 och placera dem i ett test provrörsställ . Ordna lösningar av stärkelse, avjoniserat vatten och KI /jodlösning på bänken topp Addera 3
Fyll röret 1 med 3 ml avjoniserat vatten med användning av en pipett . detta kommer att fungera som tomt. Fyll rören 2-6 med 3,0 ml , 2,9 ml , 2,7 ml , 2,4 ml och 2,1 ml avjoniserat vatten respektive. Lägg stärkelselösning till var och en av rören 2-6 i följande ordning : tub 2 blir 0 ml , tub 3 får 0,1 ml , rör 4 får 0,3 ml , rör 5 får 0,6 ml och rör 6 får 0,9 ml
< . br > 4
Tillsätt en droppe av KI /jodlösning till var och en av de sex rören . Blanda försiktigt varje rör ordentligt innan du spelar in deras absorbans i en spektrofotometer .
5
Fyll kyvetten med blindlösningen , rengöra utsidan av kyvetten och placera den i det tomma hålet i spektrofotometer. Justera absorbansen till noll. Alla andra lösningar kommer att ge en positiv absorbans .
6
Fyll provkyvetten med var och en av de övriga fem lösningar i tur och ordning . Torka utsidan av kyvetten före varje mätning. Spela absorptionsvärdet för varje rör . Skölj kyvetten med den nya lösningen minst en gång innan du fyller för testet .
7
Gör en graf som plottar absorbansavläsningar mot stärkelsekoncentration. Detta är den standardkurvasom gör att du kan bestämma koncentrationen av en lösning som har en given absorbansavläsning .
Fastställande Amylas Koncentration
8
Rengör alla provrören från den första delen av testet. Behåll den tomma rör för användning senare .
9
Skaffa ett blodprov från patienten . Placera provet i en centrifug och separera röda blodkropparfrån blodplasma .
10
Fyll ett provrör med 9 ml avjoniserat vatten och 1 ml blodplasma . Detta är en 1:10 spädning av plasman. Blanda röret noggrant och pipettera 1 ml av lösningen in i ett andra provrör. Märk de två rören med deras innehåll .
11
Förbered dig på att utföra en tidsinställd test. Ha ett stoppur händig och ställa in sju provrör med kyvetter i provrörsställ . Du kommer att ta avläsningar varannan minut när testet startar . Notera den exakta tiden och absorbansen för var och en av de sju datapunkter. Fyll vardera av de sju provrör med 2 ml avjoniserat vatten .
12
till 9 ml av den stärkelselösning till provröret som har ett ml av 1:10 utspädning av plasma. Så fort du börjar lägga till stärkelselösningen, starta stoppuret . Blanda provröret väl och pipett 1 ml av stärkelse /plasma -lösning i den första av sju provrör . Registrera tiden . Tillsätt 1 droppe av KI /jodlösning till provröret och blanda .
13
Överföring till kyvetten , torka av utsidan och spela absorbansen . Upprepa processen med de återstående sex provrör med två minuters mellanrum . Vid slutet av den tidsinställda testet bör du ha mätvärden för den faktiska tid och absorbansen för tidsspannpå 0 , 2 , 4 , 6 , 8 , 10 och 12 minuter .
14
Använd standard kurva för att finna koncentrationen av stärkelse för var och en av de sju datapunkter. Dessa poäng kommer att minska med tiden . Amylaset digererar stärkelsen och över tiden förbrukar all stärkelse tillgänglig.
15
Graph datapunkterna för den tidsinställda testet såsom stärkelsekoncentration mot tid . Lutningen på denna kurva anger mängden amylas i plasmaprovet . Addera
Upphovsrätt © Hälsa och Sjukdom