1. Home
  2. alternativ medicin
  3. biter Stings
  4. Cancer
  5. förhållanden Behandlingar
  6. Tandhälsa
  7. Diet Nutrition
  8. Family Health
  9. Sjukvård Industri
  10. Mental hälsa
  11. Folkhälsa säkerhet
  12. Verksamheten Verksamheten

Hur Stain agarosgeler

är viktigt vid utförande av agarosgelelektrofores Visualisering av nukleinsyra eller protein. Om du arbetar utan färgning av gelen , kommer du inte att kunna se där provet du testar har nått , och därför mätningar av molekylstorlek , till exempel, kommer att vara starkt begränsad . Fläckar på gelén genom att använda en gemensam , väl trialled färgämne såsom etidiumbromid ( EtBr ) som fluorescerar under ultraviolett ljus (UV) när intercalated i DNA- eller RNA-molekyler. Färgen kommer att hjälpa dig att utföra experimentet genom att visa upp molekylerna i ditt prov som mörkblå märken . Detta är vad du behöver
Skyddshandskar och skyddsglasögon
Agarosgel
Etidiumbromid
pipett ( Gilson för små mängder ) katalog Loading buffert
Visa fler Instruktioner

1

Använd skyddshandskar som är tunn men skyddande och låta dina fingrar och händer obegränsad rörelse . Använd en liten pipett för att dra några EtBr ( eller motsvarande fläck ) ur sin behållare .
2

Tillsätt 0,5 mikrogram per milliliter av din valda fläck på ditt prov . Täck provet och blanda manuellt . Flera shakes bör räcka. Addera 3

till en negativt laddad laddningsbuffert till blandningen med användning av en pipett. Detta möjliggör att färgade provet för att ses med blotta ögat , i naturligt ljus och eliminerar behovet av dyra, skadliga UV som annars skulle nedbryta molekylerna i vilket man är intresserad . Xylencyanol är ett vanligt använt laddningsbuffert , men andra är tillgängliga. Se till att du väljer en buffert som kommer att köra med samma hastighet som molekylen du mäter . Xylencyanol kör med samma hastighet som DNA-fragment som är 5000 baspar (bp) i längd .
4

Använd en ren pipett för att tillämpa din förbättrade prov till brunnarna i början av din agarosgel . Volymen du använder beror på storleken av gel kammar ( väl tjocklek och längd och gel tjocklek) . Färga ditt prov och inte kontroll så att du kan bestämma de parametrar som du är intresserad av ( t.ex. molekylvikt ) korrekt och effektivt .
5

Alternativt utför Southern blotting som ett sätt att visualisera ditt prov . Överföring av DNA till ett nitrocellulosamembran . Utsätta den för en hybridiseringssond . Detta är inte färgning , som sådan , men ger ett lämpligt alternativ , som beskrivs av tillgång Excellence . Addera

SHARE

Upphovsrätt © Hälsa och Sjukdom