Hur man analyserar Flödescytometri Data

Flödescytometri är processen att analysera och räkna celler och partiklar med hjälp av teorin om ljusspridning och ljus excitation . Cellerna tvingas genom en mantel en i taget och passerar genom strålen hos en laser . Lasern exciterar de kemikalier som cellerna. Olika typer av celler som avger olika typer av ljus. Optiska detektorer eller linser plocka upp och mäta ljuset, som överför ljuset till en dataström . Genom att analysera data , kan tekniker räkna fördelningen av celler och hjälpa läkare och forskare fatta beslut om behandling . Instruktioner
1

Ställ in parametrarna för cytometern . Varje cytometern har en datorkomponentsom accepterar det ljus som avges från cellerna och omvandlar mängden och kvaliteten på ljuset till tillgängliga uppgifter . Eftersom det finns olika typer av celler , finns det en stor mängd data som skapas . Inställning av parametrarna i de data som behövs bromsar flödet av information till en hanterbar nivå. Vissa alternativ är att ställa in spänningsnivån , justera laserpulsparametrareller inställning av ljuströskel.
2

Välj filtren varje optisk lins . Filter som skär ut specifik bandbredd för varje lins tillåter cytometern att känna igen de olika kemiska egenskaperna hos varje cell . Det gör också cytometern att känna igen om ljuset reflekteras rakt fram , som en framåtspridning ( FS ) eller om det återspeglas i 90 - graders vinkel i en sidospridning ( ss. )
3

Välj logaritmisk eller linjär förvärv . Linjär förvärvet är rådata som genereras av cytometern . Det visar den typ av cell , eller den kemiska sammansättningen hos cellerna som strömmar genom laserstrålen. Den logaritmiska funktionen går ett steg längre . Den använder en matematisk funktion att projicera ytterligare celler som kanske inte upptäckas av cytometern . Till exempel kan celler visar en kemisk förening som är en biprodukt av en virusinfektion. Även om viruset kan vara för liten för att kunna detekteras av det ljusflöde, kommer den logaritmiska funktionen antar närvaron av viruset baseras på den kemiska sammansättningen av cellerna.
4

Välj en eller två parameter histogrammen . Dessa typer av diagram används för att visa de data som samlats in av cytometern . A en parameter histogram är lämpligt om data alla plottas på en "positiv "-axeln , vilket betyder att allt ljus reflekteras och mäts. Ett enkelt sätt att tänka på detta är att föreställa sig ett stapeldiagram , med nivåer på vänster och botten av ramen . Informationen plottades mellan dessa två parametrar. Men för de celler som absorberar olika mängder av ljus , är en två parameter histogram används . Detta gör att de data som skall plottas på både en positiv och negativ axel . Addera