Avföring från människor och andra varmblodiga djur innehåller bakterier som kallas koliforma bakterier. Dessa förekommer naturligt i matsmältningskanalen, där de hjälper till att bryta ner maten. Även om koliforma bakterier inte i sig orsakar sjukdom, kan deras närvaro i vatten, jord och vegetation tyda på att det finns andra bakterier, virus och parasiter som faktiskt kan göra människor sjuka.
Genom att analysera förekomst och mängd av koliforma bakterier i ett vattenprov kan man avgöra om vattnet är lämpligt att använda. De vanligaste metoderna för att upptäcka och uppskatta antalet koliforma bakterier är multipel rörjäsning, membranfiltrering samt det kromogena substrattestet.
När koliforma bakterier placeras i ett näringsmedium som innehåller laktos jäser de sockret och bildar gas. Vid multipel rörjäsning (multiple-tube fermentation) överförs olika utspädningar av ett vattenprov till rör med näringsbouillon, som sedan inkuberas vid 35 grader Celsius för att bakterierna ska växa.
Analysen kräver fem rör för varje utspädning, med minst tre seriella utspädningar av provet – till exempel 1 ml, 0,1 ml och 0,01 ml. Gasbildning eller synlig bakterietillväxt inom 48 timmar indikerar ett positivt resultat. Antalet rör med positiva respektive negativa resultat gör det möjligt att uppskatta hur många koliforma bakterier som finns i provet. En statistisk tabell, kallad Most Probable Number (MPN)-index, används för att beräkna tätheten av bakterier.
Vid testning av fekala koliforma bakterier med membranfiltrering passerar ett vattenprov genom ett membranfilter med porer på 0,45 mikron – en diameter som är tillräckligt liten för att fånga upp alla bakterier. Filtret placeras därefter på en näringsbouillon som är särskilt anpassad för odling av fekala koliforma bakterier och inkuberas vid 44,5 grader Celsius i 24 timmar.
Efter inkubationsperioden räknas de synliga bakteriekolonierna, och slutresultatet för tätheten av koliforma bakterier beräknas. Metoden är snabb och ger konkreta, räknbara resultat, vilket gör den till ett vanligt val vid rutinanalyser av dricksvatten.
Det kromogena substrattestet använder ämnen som byter färg under en kemisk reaktion. Detta utnyttjas för att påvisa vissa proteiner, eller enzymer, som är specifika för koliforma bakterier. Metoden kan användas både för att avgöra om bakterier finns eller saknas i provet och för att uppskatta deras antal, i en process som liknar multipel rörjäsning.
Substratmedier finns kommersiellt tillgängliga i engångsrör, små brunnar eller i kärl som rymmer prover på 100 ml. Det inokulerade mediet inkuberas vid 35 grader Celsius under den tid som substrattillverkaren anger och undersöks sedan för tecken på färgförändringar. Tätheten av koliforma bakterier bestäms därefter med hjälp av en tabell som tillhandahålls av tillverkaren.
Vilken provstorlek som krävs för testningen styrs av vattnets avsedda användningsområde:
Ju renare vattnet förväntas vara, desto större provvolym behövs för att kunna påvisa även låga halter av koliforma bakterier. Regelbunden provtagning är särskilt viktig för dricksvatten, eftersom fynd av fekala koliforma bakterier kan indikera en nyligen skedd förorening och därmed en hälsorisk.
Hälsa och Sjukdom © https://www.sjukdom.online