Så använder du dinitrosalicylsyra för att mäta blodsocker

Vad är dinitrosalicylsyra?

Dinitrosalicylsyra (DNS, även kallad 3,5-dinitrosalicylsyra) är ett kemiskt reagens som används för att bestämma sockerinnehåll, framför allt glukos. DNS-metoden används för att uppskatta mängden socker i blod, cerebrospinalvätska och andra kroppsvätskor hos människan.

Metoden är särskilt värdefull inom diabetiskliniker på sjukhuslaboratorier, eftersom hela processen bara tar ungefär tio minuter och reagenserna är stabila, billiga och enkla att framställa. Blodsockernivån har stor metabol betydelse och används för att identifiera sockerrelaterade rubbningar som hyperglykemi (förhöjt blodsocker). Ett effektivt sätt att bedöma blodsockernivån är just genom att använda dinitrosalicylsyra.

Det här behöver du

• 3,5-dinitrosalicylsyra (17,5 g)
• Hett destillerat vatten, ca 60 °C (1 000 ml)
• Filterpapper
• Tratt
• Standardglukoslösning, 1 %, i mättad bensyralösning
• Försluten behållare (större än 100 ml)
• Fenol (13,8 g)
• Natriumbisulfit (13,8 g)
• Natriumhydroxidlösning, 10 % (350 ml)
• Kaliumnatriumtartrat (510 g)
• Vatten med normal rumstemperatur (180 ml)
• Pipetter (0,1 eller 0,2 ml)
• Kokande vattenbad
• Laboratorieutrustning för uppvärmning
• Laboratorieutrustning för noggrann mätning av små mängder fasta ämnen och vätskor

Så gör du – steg för steg

Steg 1: Framställ Lees reagens A

Häll 17,5 g 3,5-dinitrosalicylsyra i 1 000 ml hett destillerat vatten (cirka 60 °C) och rör om tills syran har löst sig helt. Filtrera lösningen genom filterpapper och tratt och förvara den vid 25 °C. Denna lösning benämns nedan Lees reagens A.

Steg 2: Bered glukos-DNS-lösningen

Blanda en 1-procentig glukoslösning i mättad bensyra med 100 ml av en 1,75-procentig lösning av Lees reagens A. Blanda noggrant genom att vända på den förslutna behållaren upprepade gånger tills innehållet är homogent. Förvara lösningen vid 25 °C.

Steg 3: Framställ Lees reagens B

Lös upp 13,8 g fenol och 13,8 g natriumbisulfit i 350 ml 10-procentig natriumhydroxid. Tillsätt denna lösning till 510 g kaliumnatriumtartrat i 180 ml vatten. Filtrera den färdiga lösningen genom filterpapper och förvara den i rumstemperatur. Detta utgör Lees reagens B.

Steg 4: Ta blodprovet

Tag blod genom kapillärpunktion med vanliga pipetter om 0,1 eller 0,2 ml. En 0,1 ml-pipett ger större noggrannhet vid mätning av 0,1 ml blod, medan det förhållandet är omvänt vid mätning av 0,2 ml blod.

Steg 5: Blanda blodet med glukos-DNS-lösningen

Töm blodet från pipetten ner i glukos-DNS-lösningen i ett provrör. Blandningen ska hålla proportionen 1:20. Sug upp och tryck ut lösningen i pipetten upprepade gånger tills blandningen fördelats jämnt mellan provröret och pipetten. Låt pipetten stå kvar i lösningen och avlägsna sedimentet ur pipetten när det har lagrat sig, efter en till två timmar.

Steg 6: Tillsätt reagens B och värm provet

Tillsätt en lika stor volym av Lees reagens B till den klara överstående vätskan. Värm sedan provet i ett kokande vattenbad i minst tre minuter.

Steg 7: Jämför färgresultatet

Jämför den röda färg som utvecklats med den färg som produceras av en standardglukoslösning. Genom denna jämförelse kan du bedöma blodets sockerinnehåll.

Säkerhetstips

Kom ihåg att både fenol och natriumhydroxid är frätande ämnen. Använd alltid skyddshandskar, skyddsglasögon och laboratorierock, och arbeta i väl ventilerad miljö eller under dragskåp när du hanterar reagenserna.