Hur skiljer IMViC-testerna E. coli från Enterobacter aerogenes?

Vad är IMViC-testerna?

IMViC är en serie av fyra biokemiska prov som används inom mikrobiologin för att särskilja arter inom familjen Enterobacteriaceae, framför allt koliforma bakterier. Förkortningen står för de fyra testen: Indol, Metylröd, Vioges-Proskauer och Citratutnyttjande. Genom att kombinera resultaten får man ett karakteristiskt reaktionsmönster som gör det möjligt att skilja exempelvis Escherichia coli från Enterobacter aerogenes.

1. Indoltestet

Testet påvisar bakteriens förmåga att bryta ner aminosyran tryptofan till indol med hjälp av enzymet tryptofanas. Efter tillsats av Kovacs reagens färgas indolen röd.

• E. coli: Positivt – producerar indol, varvid reagenset blir rött.
• E. aerogenes: Negativt – saknar förmågan att bilda indol.

2. Metylrödtestet

Testet visar om bakterien utför blandningssyrning, det vill säga bildar stora mängder stabila syror (mjölksyra, ättiksyra, myrsyra) som sänker pH till under 4,4 och färgar den röda indikatorn.

• E. coli: Positivt – bildar tillräckligt med syra för att indikatorn ska bli röd.
• E. aerogenes: Negativt – producerar inte tillräckligt med syra, eftersom kolhydrater i stället omvandlas till mer neutrala slutprodukter.

3. Voges-Proskauer-testet

Testet detekterar acetoinkarbinol (acetoin), en neutral mellanhämning som bildas vid 2,3-butandiolsyrning. Acetoin oxideras till diacetyl, vilket ger en röd färgreaktion.

• E. coli: Negativt – bildar inte acetoin.
• E. aerogenes: Positivt – producerar acetoin, vilket ger positiv röd färgreaktion.

4. Citratutnyttjande

Testet undersöker om bakterien kan använda citrat som enda kolkälla, vanligen på Simmons citratagar. Tillväxt leder till alkalinisering, varvid indikatorn går från grön till blå.

• E. coli: Negativt – kan inte utnyttja citrat som ensam kolkälla; mediet förblir grönt.
• E. aerogenes: Positivt – växer på citrat och bildar alkaliska produkter som färgar mediet blått.

Sammanfattande resultatmönster

Kombinationen av de fyra testen ger varje art ett tydligt, typiskt mönster:

• E. coli: + + − − – indol-positiv, metylröd-positiv, Voges-Proskauer-negativ och citrat-negativ.
• E. aerogenes: − − + + – indol-negativ, metylröd-negativ, Voges-Proskauer-positiv och citrat-positiv.

Eftersom de två arternas reaktionsmönster i princip är spegelbilder av varandra utgör IMViC-serien ett enkelt, snabbt och tillförlitligt verktyg för differentiering av E. coli och E. aerogenes i laboratoriemiljö.