Så färgar du ett utstryk av stafylokocker för ljusmikroskopi

Medan många arter av de grampositiva bakterierna Staphylococcus lever harmlöst på huden kan vissa arter orsaka sjukdom om de tar sig in i kroppen genom ett sår eller skrubbsår. För att bekräfta förekomsten av stafylokocker fäster en laboratorietekniker ett utstryk av bakterierna på ett objektglas, färgar det och granskar det sedan i ett ljusmikroskop. Färgningen ger bakterierna kontrast och gör dem betydligt lättare att identifiera.

Saker du behöver

• Objektglas med stafylokockutstryk
• Pincett
• Bunsenbrännare
• Handskar
• Färgningsställning
• Färgämne (till exempel metylenblått eller kristallviolett)
• Torkställning för objektglas
• Destillerat vatten i sköljflaska
• Sugpapper

Instruktioner

1. Fixera utstryket med värme

Håll objektglaset med pincetten och för dess undersida snabbt fram och tillbaka genom spetsen av bunsenbrännarens låga i ungefär en sekund. Om ingen bunsenbrännare finns tillgänglig kan du istället placera glaset på en värmplatta vid 60 grader Celsius i tio minuter.

2. Låt glaset svalna

Låt objektglaset svalna helt innan du fortsätter, så att bakterierna inte spricker eller deformeras av överhettning.

3. Kontrollera kvaliteten

Granska objektglaset i ljusmikroskopet för att säkerställa att bakterierna är i gott skick. Upprepa värmefixeringen med ett nytt objektglas om det behövs.

4. Skydda dina händer

Ta på dig handskar för att skydda händerna mot färgämnet, som lätt ger svårt borttagbara fläckar.

5. Placera glaset för färgning

Placera objektglaset i färgningsställningen över diskhon. Har du ingen färgningsställning kan du hålla glaset med pincett eller en klädnypa.

6. Applicera färgen

Häll rikligt med färglösning över utstryket och låt överskottet rinna av.

7. Låt färgen verka

Vila objektglaset på torkställningen och låt färgen torka in ordentligt i utstryket.

8. Skölj av försiktigt

Luta objektglaset i en vinkel över diskhon och skölj varsamt med destillerat vatten. Låt vattnet rinna över glaset från en punkt ovanför färgen i stället för att rikta strålen direkt mot utstryket, vilket kan skölja bort bakterierna.

9. Torka glaset

Dabba objektglaset torrt med sugpapper. Hushållspapper eller ett absorberande underlägg fungerar också bra om du saknar sugpapper.

10. Granska resultatet

Granska objektglaset i ljusmikroskopet för att bekräfta att färgningen blivit jämn och korrekt. Bakterierna ska nu synas tydligt och kunna identifieras som stafylokocker.

Tips och säkerhet

Arbeta alltid noggrant när du hanterar bakteriekulturer och använd skyddshandskar genom hela proceduren. Vid gramfärgning framträder stafylokocker som grampositiva, det vill säga violettfärgade, klotformade bakterier som ofta ligger i druvklusterliknande grupper – ett karaktäristiskt kännetecken för släktet.