Bakterier finns överallt, även om vi inte kan se dem med blotta ögat. De förekommer i mat, jord, vatten, på ytor i våra hem samt i och på våra kroppar. Bakterier lever normalt i blandade populationer. Att isolera en specifik bakterie från andra bakteriearter i ett prov gör det möjligt för mikrobiologer att studera dess struktur och funktion – egenskaper som är avgörande vid identifieringen. Mikrobiologer isolerar ofta bakterier med hjälp av en av flera streak plate-tekniker, även kallade strykplattmetoder.
En odlingsögla (inokuleringsögla) används för att överföra mikroorganismer. Den består av en tråd av nikrom eller platina med en liten, cirkulär ögla i ena änden. Den andra änden är rak och glider in i ett handtag. Engångsöglor av plast finns också som alternativ. Bakterier kan bara isoleras om de växer. Mikrobiologer odlar bakterier för streak plate-isolering i grunda, runda petriskålar fyllda med ett fast näringsmedium som kallas agar. Agar efterliknar den miljö där bakterierna naturligt växer. Skålarna är sterila och försedda med lock för att förhindra tillväxt av oönskade organismer. Under isoleringsarbetet steriliseras odlingsöglan upprepade gånger i en Bunsenbrännares låga.
Streak plate-tekniken är den mest använda metoden för att isolera specifika bakterier från ett prov som innehåller en blandning av mikroorganismer. I grunden späder tekniken ut antalet organismer och minskar deras täthet, vilket gör det möjligt för mikrobiologer att skilja åt och isolera enskilda bakteriekolonier. En koloni är ett synligt kluster av bakterier, och alla bakterier i en enskild koloni härstammar från samma ursprungliga cell. Följaktligen är varje isolerad koloni en "ren" koloni. Den rena kolonin överförs därefter till en ny platta för att skapa en renodlad kultur som består av en enda bakterietyp.
När tekniken utförs korrekt tunnar streak plate-isoleringen ut provet och gör det möjligt för enskilda bakterieceller att utvecklas till väl separerade kolonier. Mikrobiologen börjar med att sterilisera odlingsöglan i en låga. Öglan kyls genom att den försiktigt rörs mot agarn, varefter den doppas i provet och stryks fram och tillbaka för att täcka en sektion av plattan. Därefter steriliseras och kyls öglan igen, och en andra, intilliggande sektion inokuleras genom att öglan dras genom den första sektionen flera gånger och sedan förs över den nya sektionen i sicksackrörelser. På så sätt plockas ett litet antal bakterier upp från den första sektionen och överförs till den nästa. Antalet gånger denna grundprocedur upprepas beror på vilken streak plate-metod som används. Oavsett metod används ursprungsprovet endast för att inokulera plattans första sektion.
Streak plate-metoderna skiljer sig åt beroende på hur många agaravsnitt som stryks. T-streak-metoden använder tre avsnitt: den övre halvan av plattan samt två lika stora nedre avsnitt. Det ursprungliga inokulatet placeras i plattans övre halva, varefter bakterier dras från den övre delen till ett av de nedre avsnitten och sedan från det avsnittet till det andra. I kvadrantmetoden stryks fyra lika stora avsnitt, vilket ger en ännu mer gradvis utspädning. Den kontinuerliga strykmetoden innebär vanligtvis att man inokulerar plattans övre halva, roterar plattan 180 grader och sedan inokulerar den andra halvan – utan att sterilisera öglan eller dra bakterier från föregående avsnitt. Valet av metod beror på provets bakterietäthet och det resultat laboratoriet eftersträvar.
Hälsa och Sjukdom © https://www.sjukdom.online