Syrafastfärgning av sputum – vad betyder ett positivt resultat för tuberkulos?

Vad innebär syrafastfärgning av sputum?

Syrafastfärgning är en mikroskopisk teknik som används för att påvisa förekomsten av syrafasta bakterier, exempelvis Mycobacterium tuberculosis – bakterien som orsakar tuberkulos (TB). Om syrafasta stavar (AFB) påvisas i ett sputumprov är detta en stark indikation på ett eventuellt positivt tuberkulostest. Bakterierna har nämligen en unik cellväggsstruktur som behåller vissa färgämnen vid färgningen, vilket gör dem synliga i mikroskopet.

Ziehl-Neelsen-färgning – så går metoden till

Ziehl-Neelsen-färgning är en av de mest använda teknikerna för att påvisa syrafasta bakterier. Metoden omfattar följande steg:

1. Preparatframställning av sputumprovet

Patienten hostar djupt och producerar ett sputumprov. Provet stryks sedan ut på ett objektglas så att det fördelas jämnt över ytan.

2. Värmefixering

Objektglaset med utstryket värmebehandlas för att få bakterierna att fästa bättre vid glaset och för att döda eventuella kvarvarande levande mikroorganismer.

3. Färgning

Det fixerade preparatet översvämmas med ett primärt färgämne, vanligtvis karbolfuksin eller basiskt fuksin. Färgämnet tränger igenom de vaxartade cellväggarna hos de syrafasta bakterierna. Glaset hettas försiktigt upp för att underlätta att färgen tränger in ordentligt.

4. Avfärgning med syra-alkohol

Därefter sköljs glaset med en syra-alkohollösning, som avfärgar de flesta bakterier – utom de syrafasta stavarna, som behåller den primära färgningen tack vare sin speciella cellvägg.

5. Motfärgning

Till sist appliceras en motfärg, exempelvis metylenblått, för att skapa kontrast och göra de icke-syrafasta bakterierna synliga i preparatet.

Mikroskopisk undersökning och tolkning av resultatet

När samtliga steg har genomförts granskas preparatet i mikroskop med oljeimmersion för att påvisa förekomsten av syrafasta stavar. Om AFB observeras tyder detta på en eventuell tuberkulosinfektion. Därefter utförs ytterligare diagnostiska tester, såsom bakterieodling och molekylära analyser, för att bekräfta diagnosen och fastställa en lämplig behandlingsplan.

Viktiga begränsningar att känna till

Det är dock viktigt att komma ihåg att förekomsten av syrafasta stavar i ett sputumprov inte i sig bekräftar tuberkulos definitivt. En korrekt diagnos och effektiv behandling kräver alltid en kombination av kliniska fynd, laboratorietester och medicinsk expertis. Därför bör ett positivt mikroskopifynd alltid följas upp av kompletterande undersökningar innan behandling inleds.