Microtox®-testet är en standardiserad, snabb (5–30 min) in vitro bioanalys som använder den marina bakterien Vibrio fischeri (stam NRRL B-11177) för att bedöma akut toxicitet.
Princip
- V. fischeri bioluminescerar naturligt (luciferas-reaktion).
- Toxiner hämmar metabolisk aktivitet → ljusutbyte minskar.
- % hämning vs. kontroll = toxicitetsmått.
- EC50 (effektiv koncentration som orsakar 50% ljusförlust) beräknas.
Protokoll
- Rekonstituera frysturkade bakterier.
- Exponera för provutspädningar + förspädningskontroll.
- Inkubera vid 15°C (standard).
- Läs luminometer vid 5, 15, 30 min.
- Programvara beräknar EC50, konfidensintervall.
Tillämpningar
- Avloppsvatten/reningsverksutsläpp screening.
- Kemikalie/produkt toxicitet ranking.
- Sediment porvatten, jordläckvatten.
- Dricksvattenkontaminationshändelser.
- Processtyrning (industriell).
Fördelar
- Snabbt, lågt kostnad, liten provvolym.
- Bred känslighet (organiska, anorganiska, tungmetaller).
- Standardiserat (ISO 11348, ASTM D5660).
- Bärbart instrument (Microtox® M500, FX).
Begränsningar
- Bakteriellt system ≠ däggdjur/mänsklig toxicitet.
- Identifierar inte specifik toxin.
- Interferenser: färg, dimma, volatilitet, pH, salinitet (justeringar behövs).
- Ej för kroniska/subletala endpoints.
Regulatorisk användning
Screeningverktyg; inte ett fristående regulatoriskt endpoint. Kompletterar specifika kemiska analyser och högre nivå bioanalyser (daphnia, fisk).
