Utspätt eller koncentrerat blodprov i hemocytometern vid räkning av RBC och WBC?

Vid räkning av röda blodkroppar (RBC/erytrocyter) och vita blodkroppar (WBC/leukocyter) används alltid ett utspätt blodprov i hemocytometern – aldrig ett koncentrerat. Om blodprovet skulle koncentreras blir cellvärdena felaktiga och opålitliga. Nedan beskrivs arbetsgången för att räkna RBC och WBC med hjälp av en hemocytometer.

Räkning av röda blodkroppar (RBC)

1. Beredning av utspett blodprov

– Späd blodprovet i en särskild spädvätska, oftast med ett spädningsförhållande på 1:200 för röda blodkroppar.
– Blanda det utspädda blodet noggrant.

2. Fyllning av hemocytometern

– Placera ett täckglas på hemocytometern och se till att kanterna är förseglade så att en räkningskammare bildas.
– Tillför en liten mängd av det utspädda blodprovet till hemocytometern med hjälp av en kapillärpipett eller mikropipett.

3. Räkning av röda blodkroppar

– Använd ett mikroskop för att synliggöra cellerna i räkningskammaren.
– Fokusera på rutnätet på hemocytometern, som är indelat i stora och mindre kvadranter.
– Räkna antalet röda blodkroppar inom de angivna kvadraterna enligt gällande räkneregler (t.ex. att celler som vidrör övre och vänstra linjen räknas med, medan celler som vidrör nedre och högra linjen exkluderas).

4. Beräkning

– Multiplicera antalet räknade röda blodkroppar med lämplig spädningsfaktor och kammarens djup för att få fram RBC-värdet per volymenhet (vanligen celler/µL).

Räkning av vita blodkroppar (WBC)

1. Beredning av utspett blodprov

– Förbered ett separat utspätt blodprov, vanligtvis med ett spädningsförhållande på 1:20 för vita blodkroppar.
– Blanda det utspädda blodet noggrant.

2. Fyllning av hemocytometern

– Upprepa samma förfarande som vid RBC-räkningen: placera ett täckglas på hemocytometern och tillför det utspädda blodprovet.

3. Räkning av vita blodkroppar

– Använd ett mikroskop för att synliggöra cellerna i räkningskammaren.
– Fokusera på rutnätet och räkna antalet vita blodkroppar inom de angivna kvadraterna.
– Differentiera vid behov mellan olika typer av vita blodkroppar (t.ex. neutrofiler, lymfocyter och monocyter).

4. Beräkning

– Multiplicera antalet räknade vita blodkroppar med lämplig spädningsfaktor och kammarens djup för att få fram WBC-värdet per volymenhet (vanligen celler/µL).

Följ alltid tillverkarens anvisningar för hemocytometern samt laboratoriets egna riktlinjer noggrant för att säkerställa en korrekt och reproducerbar cellräkning.