Detekterar ELISA närvaron av HIV?

Enzym-linked immunosorbent assay (ELISA) kan användas för att detektera förekomst av HIV. Specifikt används det vanligtvis för att detektera antikroppar mot HIV-1 och HIV-2 i humant serum eller plasma.

Här är en översikt över hur ELISA används för HIV-testning:

Antigenbeläggning:Mikrotiterplattor är belagda med antigener som härrör från HIV-proteiner, såsom höljesglykoproteinet (gp120, gp41) eller andra virala komponenter.

Provtillsats:Spädda testserum- eller plasmaprover tillsätts till brunnarna på den antigenbelagda plattan.

Antikropp-antigen-reaktion:Om HIV-antikroppar finns i provet, kommer de att binda till motsvarande antigener belagda på plattan. Detta bildar ett antigen-antikroppskomplex.

Tvättsteg:Obundna ämnen, såsom överskott av provkomponenter, tvättas bort.

Enzymkopplad sekundär antikropp:En enzymkopplad sekundär antikropp specifik för de infångade HIV-antikropparna tillsätts. Denna antikropp är konjugerad till ett enzym, såsom pepparrotsperoxidas (HRP).

Substrattillsats:Ett substrat specifikt för enzymet tillsätts. I närvaro av HRP inträffar en kolorimetrisk eller fluorescerande reaktion.

Färgutveckling:Efter en specifik inkubationsperiod omvandlas substratet till en färgad eller fluorescerande produkt som kan detekteras och kvantifieras med hjälp av en ELISA-läsare.

Tolkning av resultat:Den optiska densiteten (OD) eller fluorescensintensiteten mäts för att bedöma mängden infångade HIV-antikroppar i provet. Ett positivt resultat indikerar närvaron av HIV-antikroppar, vilket tyder på potentiell HIV-infektion. Ett gränsvärde definieras för att skilja mellan positiva och negativa resultat.

ELISA används i stor utsträckning vid screening och diagnos av HIV eftersom det ger en relativt enkel, exakt och känslig metod för att detektera HIV-antikroppar. Det bör dock noteras att ELISA-resultat ibland kan kräva ytterligare bekräftelse med ytterligare tester, såsom Western blot eller viral load-testning, för att säkerställa att diagnosen är korrekt.