Ellman-analysen gör det möjligt att övervaka hämningen av kolinesteras i blodet – ett enzym som bryter ner signalsubstanser som acetylkolin. Genom att mäta denna enzymaktivitet kan metoden användas för att avgöra om en person har exponerats för vissa bekämpningsmedel, exempelvis organofosfater och karbamater.
När metoden kombineras med mätning av metaboliter i urinen ger Ellmans reagensmetod laboratorier ett snabbt och enkelt sätt att fastställa om en provperson har exponerats för organofosforbaserade bekämpningsmedel eller inte.
Endast en enda droppe blod krävs för att genomföra analysen. Till skillnad från många andra laboratoriemetoder behövs varken en stor centrifug eller annan tung utrustning – det enda instrument som krävs är en spektrofotometer eller motsvarande apparat som kan detektera ljusvågor.
Analysen utförs i en mikrotiterplatta vars brunnar beläggs med analysens centrala blandning, som innehåller substratet acetyltiokolin. När varje brunn belagts tillsätts en liten mängd blod från provpersonen. Därefter adderas ett reagens som identifierar proteinet av intresse, enzymet acetylkolinesteras (AChE), och binder till detta.
Strax innan mätningen sker tillsätts Ellmans reagens (DTNB), som bildar en gul färgad produkt. Mätningen utförs vid en våglängd på 405 nm, där laboratoriets instrument registrerar hur mycket ljus som absorberas. Absorbansen speglar enzymaktiviteten och visar därmed graden av hämning av kolinesteraset i blodprovet.
Det kromogena (färgbildande) reagens som används vid testet har visat sig förändra ljusets våglängd när det utsätts för högre temperaturer, vilket kan påverka mätresultaten. Förvara därför alltid reagenset kyrt, helst i kylskåp, och låt det endast nå rumstemperatur strax före användning.
Hälsa och Sjukdom © https://www.sjukdom.online