Protokoll för en DAPI Stain

DAPI står för den kemiska 4'- 6 - Diamidino - 2 - fenylindol , och används för att färga dubbelsträngat DNA . Den förening som bildar blå fluorescerande komplex med kärnor av celler och så används vanligen för att belysa strukturen i cellerna . Den typ och densitet av färgning kan också identifiera döda eller döende celler . Förberedelse DAPI Lösning

DAPI- lösning först måste spädas till en arbetslösning . Exempelvis måste 10 mg av Invitrogen DAPI produkt blandas med 2 ml avjoniserat vatten , och späddes sedan ytterligare till 300 nano - molar koncentration ( riktningar kommer att vara närvarande på produkten ) med fosfatbuffrad saltlösning (PBS).

Förbereda Sample

Fix provet som är lämpligt för den typ av prov som skall testas på en bild . Addera 300 mikroliter av DAPI arbetslösning till provet och inkubera under 1-5 minuter. Skölj objektglaset med PBS . Addera Analysera

Använd ett fluorescensmikroskop för att titta på den sidmonterade prov . De DAPI - färgade kärnor kan identifieras genom en blå fluorescens . Addera