Molisch-testet är ett klassiskt kemiskt test som används för att påvisa förekomsten av kolhydrater (sackarider) i ett prov. Testet är uppkallat efter den österrikiske botanikern Hans Molisch och bygger på att koncentrerad svavelsyra dehydrerar kolhydraterna till furfural eller hydroxymetylfurfural. Dessa föreningar reagerar därefter med α-naftol och bildar en karakteristisk lila eller violett färgning.
1. Provberedning: Ta en liten mängd av ämnet som ska testas i ett provrör. Om provet är fast, lös upp eller suspendera det i en liten volym vatten.
2. Tillsats av α-naftol: Tillsätt några droppar α-naftollösning (1 % i etanol) till provröret.
3. Koncentrerad svavelsyra: Häll försiktigt i koncentrerad svavelsyra (H₂SO₄) längs provrörets vägg så att den bildar ett eget skikt under provlösningen. Rör inte ihop de två skikten.
4. Observation: Studera reaktionszonen där de två skikten möts. Om kolhydrater finns i provet utvecklas en lila eller violett färgning vid gränssnittet.
1. Dehydrering av kolhydrater: Den koncentrerade svavelsyran avlägsnar vatten från kolhydratmolekylerna och omvandlar dem till furfural (från pentoser) eller hydroxymetylfurfural (från hexoser).
2. Reaktion med α-naftol: Furfuralen eller hydroxymetylfurfuralen som bildas i steg 1 kondenseras med α-naftol i svavelns sura miljö och bildar en lila eller violettfärgad förening. Denna färgade produkt kallas Molischs kromogen.
Positivt resultat: En lila eller violett färgning vid gränssnittet mellan de två skikten indikerar att provet innehåller kolhydrater.
Negativt resultat: Om ingen färgförändring observeras tyder det på att kolhydrater saknas, eller att koncentrationen ligger under testets detektionsgräns.
Molisch-testet är ett preliminärt, allmänt test för kolhydrater och används ofta som ett screenande första steg innan mer specifika analyser genomförs för att identifiera olika typer av sockerarter. Eftersom nästan alla kolhydrater dehydreras av stark svavelsyra ger de flesta sackarider positivt utslag. Observera dock att även ämnen som innehåller sockerkomponenter, exempelvis glykoproteiner och nukleinsyror, kan ge positivt resultat, vilket gör att ytterligare bekräftande tester ofta krävs för en säker identifikation.
Hälsa och Sjukdom © https://www.sjukdom.online