Glukosoxidas är ett vanligt använt enzym inom analytiska tillämpningar där mängden glukos i ett prov behöver bestämmas. Dess popularitet som reagens beror på flera fördelar: den låga kostnaden jämfört med andra reagens, den höga stabiliteten både i torr form och i lösning samt den låga farlighetsgraden vid hantering.
Glukosoxidas levereras oftast som en del av en analyskit som innehåller de flesta reagens du behöver för att förbereda lösningen, med tillräckligt med material för att kunna utföra hundratals analyser. Nedan följer en guide för hur du förbereder glukosoxidaslösningen. Observera att din kit innehåller specifika instruktioner för hela analysförfarandet.
Börja med att framställa en 0,1 M kaliumfosfatbuffert genom att tillsätta 13,6 mg kaliumfosfat (KH2PO4) i 800 ml destillerat vatten. Rör om tills ämnet har löst sig helt. Justera sedan pH-värdet till exakt 7,0 med hjälp av 1 M kaliumhydroxidlösning och en pH-meter. Tillsätt därefter ytterligare destillerat vatten tills den totala volymen uppgår till 1 liter.
Tillsätt 10 mg glukosoxidas per 1 ml destillerat vatten i ett separat bärglas. Blanda försiktigt genom att svalla och skaka lätt – undvik kraftig omrörning eftersom det bildar skum, vilket kan påverka enzymets aktivitet och göra doseringen mindre exakt.
Tillsätt glukosoxidaslösningen till fosfatbufferten i separata bärglas eller provrör med de olika koncentrationer som krävs för din analys. Du behöver själv beräkna vilka koncentrationer som behövs utifrån de detektionsnivåer du vill analysera samt antalet olika koncentrationer du önskar för din linjära regressionsberäkning. Att arbeta med flera väl valda koncentrationer ger en mer tillförlitlig standardkurva och därmed mer exakta mätresultat.
Hälsa och Sjukdom © https://www.sjukdom.online