Bipolär färgning är ett specifikt färgningsmönster där endast de två motsatta polerna hos en mikroorganism färgas, medan resten av bakterien förblir ofärgad eller får en markant ljusare ton. Resultatet blir ett karakteristiskt utseende som ofta liknar en säkerhetsnål, med två mörka ändar och en ljus mittsektion.
Färgningsmönstret beskrivs vanligtvis i relation till gramfärgning, den grundläggande metod som skiljer mellan gramnegativa och grampositiva bakterier. Denna information är avgörande för diagnos, val av odlingsmedium och val av initial antimikrobiell behandling.
Gramnegativa bakterier har ett tunnare peptidoglykanskikt i sin cellvägg jämfört med grampositiva bakterier. Till skillnad från grampositiva bakterier har de dessutom ett yttre membran bestående av lipopolysackarid, som åtskiljs från cellväggen av ett periplasmatiskt utrymme.
Vid färgningsprocessen förlorar gramnegativa bakterier lipopolysackaridskiktet tillsammans med primärfärgen när ett avfärgningsmedel appliceras. Motfärgen färgar därefter det kvarvarande peptidoglykanskiktet, vilket ger upphov till det karakteristiska gramnegativa färgningsresultatet. Hos grampositiva bakterier fastnar primärfärgen istället kvar i det tjockare peptidoglykanskiktet.
Wayson-färgning är en kombination av fuksin och mettylenblått med avfärgning i etylalkohol och fenol. I sin ursprungliga form var det en modifierad mettylenblåfärgning som användes för att diagnostisera böldpest, och den används fortfarande för att påvisa bipolärt färgade bakterier i kliniska prover.
Wright-färgning kombinerar sura och basiska färgämnen (eosin och mettylenblått). Metoden möjliggör differentiering av blodceller, men ger även upphov till bipolär färgning hos gramnegativa bakterier, vilket gör den användbar inom hematologi och mikrobiologi samtidigt.
Giemsa-färgning kombinerar liksom Wright eosin och mettylenblått. Denna differentialfärgning karakteriserar hur patogena bakterier fäster vid humana celler och spelar även en viktig roll vid diagnos av spiroketer och blodparasiter, exempelvis malaria.
Bipolär färgning förekommer främst vid vissa bakteriella infektioner, där Yersinia pestis är det klassiska exemplet. Den mest kända sjukdomen orsakad av denna bakterie är böldpest. Meningit utvecklas hos cirka 10 procent av de smittade, med symtom som feber, stel nacke, huvudvärk och i svåra fall koma.
Burkholderia mallei, orsakssubstansen bakom malleus (röt), uppvisar också bipolär färgning. Infektionen ger upphov till nodulära lungförändringar och sår på slemhinnorna i övre luftvägarna. Akuta symtom inkluderar hosta, feber, varigt näsflöde, sepsis och död inom några dagar. Kroniska infektioner kännetecknas av noduli i näsan och under huden som kan ulcerera; obehandlad leder sjukdomen till döden inom några månader, och överlevande blir ofta kroniska bärare av bakterien. Melioidos, orsakad av Burkholderia pseudomallei, kan ge bröstsmärta, smärta i ben och leder, hosta, lungnoduli, hudinfektioner och lunginflammation.
Wayson-, Wright- eller Giemsafärgning kan visa den typiska säkerhetsnålsliknande formen hos Yersinia pestis, men bakterien kan också framträda som en kort, kraftig stav (bacill). Bakterien färgas gramnegativt och kan odlas vid kroppsnära temperaturer, cirka 35–37 °C.
Yersinia pestis är den enda arten i sitt släkte som förblir orörlig vid rumstemperatur, vilket är ett användbart diagnostiskt kännetecken. Bipolär färgning observeras oftare i preparat från kliniska prover, som blod eller var från bölder, än i preparat från renodlade kulturer.
Burkholderia pseudomallei är en gramnegativ bakterie som, liksom Yersinia pestis, är rörlig, aerob och stavformad. Bakterien kan infektera både människor och djur och orsakar melioidos samt malleus.
Vid bipolär färgning framträder bakterien som en gramnegativ, intracellulär organism. Utöver detta har dock färgningsegenskapen begränsat identifieringsvärde när bakterien isoleras från kliniska prover. Säker identifiering måste därför baseras på bakteriologiska odlingar och biokemiska tester, vilket kan vara utmanande i västra länder där bakterien sällan påträffas och laboratoriepersonal har begränsad erfarenhet av den.
Hälsa och Sjukdom © https://www.sjukdom.online