Genetiska protokoll

Iskt DNA innehåller ritningen för cellerna att organisera sig i levande organismer . DNA innehåller fyra upprepande kvävebaserna kallade adenin, guanin, cytosin och tymin . Forskare har framgångsrikt bestäms hela bassekvensen , genomet , för många komplexa organismer, inklusive människor. Det finns många viktiga skäl att sekvensera ett genom. Medicinsk genetik handlar om upptäckten av genetiska avvikelser som orsakar sjukdomar som diabetes , Alzheimers och cancer . Evolutionära genetiker jämföra genomen från besläktade arter att utveckla korrekt taxonomi . Grundläggande genetiska protokoll i forskningen är de samma oavsett syftet med forskningen . Isolera DNA från celler

Genetisk forskning kräver utvinning av en ren DNA-prov från celler . En grundläggande protokoll börjar med att störa och ta bort skyddsväxtcellväggareller djurcellmembranmed ett enzym som kallas lysozym . Icke- genetiska cellkomponenter i form av utfällningar avlägsnas genom snabb spinning med en centrifug , medan DNA förblir i lösning. DNA utfälles därefter i närvaro av natriumacetat saltet med etanol. Slutcentrifugefällningar och pellets rent genetiskt material för forskningsändamål .
Polymerase Chain Reaction

Genetisk forskning kräver tillräckliga kopior av specificerade DNA-regioner . Den polymeraskedjereaktion , eller PCR, är en metod för att exponentiellt producera kopior av DNA. Protokollet kräver renade DNA , Taq-polymeras , baser kallas deoxinukleotider och små DNA-strängar att prima angivna området . Reaktionsblandningen placeras i en termocykler , ett instrument med förmåga att snabba temperaturförändringar . Upphettning av blandningen till 95 grader Celsius separerar dubbelsträngat DNA, kyldes sedan till 48 grader så kan sitta primrar eller glödgning , för att matcha baser. Temperaturen höjs till 72 grader när Taq-polymeras monterar deoxinukleotider , uppringd anknytning , till en ny kopia av DNA. Addera Genetisk DNA-sekvense
Sekvense data visas som färgade band som betecknar DNA-baser .

Automatiserad sekvensering används för att bestämma exakt bassekvens och jämföra normala med onormal DNA . Protokollet tillägger fluorescensmärkta dideoxinukleotider eller ddNTP , till normala PCR- reaktioner, som slumpvis slutar förlängning av DNA-fragment. Produkterna är DNA-fragment som skiljer sig med en enda bas . Varje bas -typ har en annan färg. De slutliga produkterna lastas på en automatiserad sequencer , ett instrument som är utformat för att separera fragment efter storlek på en polymer med hjälp av elektrisk ström . När fragmenten når polymer slutpunkt , spelar in en digitalkamera basfärgen och skickar data till datorn för analys .
Genotypning och DNA-fingeravtryck
DNA-fingeravtryck används för att identifiera människo kvarstår.

Genotypning är en metod som jämför små segment av ett genom från en organism till en annan . Målet är att upptäcka små skillnader i PCR- fragmentstorlek erhållna från normala eller oavsiktliga basförändringar i DNA . Protokollet designen börjar med grundläggande PCR med hjälp av en fluorescensmärkt primer för detektion på automatiserade sequencers . Märkta produkter separeras efter storlek och inspelad av digitalkamera till en dator för analys . Genotypning protokoll är utformade för rättsmedicinsk identifiering , DNA-fingeravtryck och faderskap eller identifiera genetiska avvikelser som leder till sjukdom . Addera