Co- Immunoprecipitation Protocol

Co- immunoprecipitation protokoll ( Co- IP ) är ett vanligt förekommande förfarande för att analysera proteininteraktion. Förfarandet är i allmänhet består av tre steg. En antikropp införs i ett cellysat , är antikropp -protein-komplex är kemiskt bundet och proteinet identifieras genom analyser . Co- Immunoprecipitation Sammanfattning

Co- IP består av en serie åtgärder för att säkerställa korrekta testresultat . Det första steget kräver en antikropp som är specifik för proteinet som ska läggas till. I det andra steget , protein -G eller protein A- Sepharose används för att binda antikropp- proteinkomplex . Slutligen sekvensera ett renat proteinband , eller Western blot-analys , används för att identifiera den samutfällda protein. Addera Allmänna steg

Protokollet kan delas in i tre allmänna steg i tid av mekaniken i processen . Det första steget är arbetsflödetför att avsluta förfarandet i minst tid . Det andra steget är allmänna överväganden för förfarandet . Det sista steget är felsökning . Addera Särskilda steg

arbetsflöde börjar med att förbereda kulturen för läsk analys och avslutas med bestämning av förekomst av proteiner. Allmänna överväganden består av viktiga steg såsom förrengöring , valet av buffertar och urval av protein A eller protein G -harts. Felsökning behandlar frågor som ingen upptäckt av protein , bindning av antikroppar mot proteiner, antikroppsfragment och möjligheten till ett misslyckat Co- IP . Addera