Lentivirus transfektion protokoll

amerikanska och europeiska forskare använt lentivirus i en banbrytande klinisk prövning som syftar till att bota adrenoleukodystrophy ( ALD ) , en dödlig hjärnsjukdom hos unga pojkar som orsakas av en muterad ALD -genen. Den lentivirus levererade en korrekt version av ALD -genen till två unga patienter och under 2009 meddelade forskarna att de hade stoppat utvecklingen av sjukdomen . Lentiviruses

Lentiviruses är retrovirus , eftersom deras genetiska informationen innefattas i RNA istället för DNA . De infektera humana celler och ett speciellt enzym omvandlar deras RNA till DNA , som integreras i det cellulära DNA . Cellerna replikera dessa gener , som gör fler virus som infekterar andra celler .
Ändringar

Forskare ändrat lentivirus . Istället för att leverera virusgenerna till en cell , levererar den modifierade lentivirus en terapeutisk gen såsom ALD . De placerade generna för de virala strukturella proteiner i plasmider , som är små bitar av DNA . En separat plasmid innehåller ALD -genen .

Transfektionsexperiment

Forskare framkallar de modifierade lentiviruses efter transfektion . De blandar plasmiderna med salter eller lipider som tillåter plasmiderna in i celler där de replikerade . Cellerna producerar de virala strukturella proteiner som själv montera in i viruspartiklar , som vardera innehåller en bit av RNA med ALD -genen. Dessa modifierade partiklar ur cellerna i tillväxtmediet , där de samlas för att användas i genterapiförsök .
Använder

virus är ett populärt verktyg för modifiering av celler för forskning och industriella användningsområden , utöver genterapi. Till exempel kan celler göras att uttrycka insulin för läkemedelsproduktion eller grönt fluorescerande protein för att spåra celler i migrationsstudier. Addera