Permeabiliseringsprotokoll handlar om processen att göra cellmembran genomsläppliga med hjälp av kemiska ämnen, för att kunna nå cellens inre utan att förstöra den. Dessa protokoll används främst vid studier och analyser av komponenter och molekylär metabolism hos däggdjursceller samt mikroorganismer som bakterier.
Denna metod används vid analyser av enzymet L-asparaginas, som återfinns i vissa bakterier som Escherichia coli, Enterobacter aerogenes och Pseudomonas aeruginosa. Enligt Protocol Online använder metoden ett hexanlösningsmedel (C6H14) i en vattenhaltig saltlösning för att frigöra enzymet. Hexaner utvinns genom raffinering av råolja, har låg toxicitet och betraktas som en av de mest kostnadseffektiva lösningar som idag används inom permeabiliseringsprotokoll.
Enligt en artikel publicerad i American Heart Associations tidskrift Circulation Research kan molekyler som kallas saponiner användas för permeabilisering av däggdjurscellmembran. Denna procedur tillämpas vid experiment där peptider – stora molekyler som normalt inte kan passera membranet – förs in i nyfödda hjärtceller, så kallade myocyter. Protokollet används för att studera PKC-enzymer, vilka är involverade i regleringen och takten av kontraktionen i hjärtceller, bland flera andra funktioner.
Den kemiska föreningen formaldehyd, detergensen Triton X-100 samt upp till 50 procent metanol (MeOH) används i ett permeabiliseringsprotokoll för att studera blodceller, enligt en artikel publicerad på PubMeds webbplats. Denna metod används vanligtvis för att skilja molekyler som kallas fosfo-epitoper – vilka finns i blod-, nerv-, hud- och andra celler – från andra intracellulära komponenter genom färgdifferentiering.
Hälsa och Sjukdom © https://www.sjukdom.online