DFA-test för upptäckt av Yersinia pestis
Den direkta fluorescensantikroppstesten (DFA) är den snabbaste presumtiva diagnostiska metoden för pest och ger resultat inom 1–2 timmar efter provmottagande.
Princip
- Fluorescein-märkta monoklonala antikroppar specifika för Y. pestis fraktion 1 (F1) antigen.
- Appliceras på strisar från:
- Lymfkörtelaspriat (bubo)
- Spott / bronkialtvätt (lungpest)
- Blododlingsisolat
- Vävnader från avlidna djur (gnagare, etc.)
- Inkubera, tvätta, montera; undersök under fluorescensmikroskopi (äpplegrön fluorescens i kokkobaciller).
Prestandaegenskaper
- Känslighet: 80–95% (provberoende).
- Specificitet: >95% med F1-specifika antikroppar.
- Svarstid: <1 timme för strispreparering + färgning.
- Begränsningar: Skiljer inte på levande vs. döda organismer; kan inte bestämma antimikrobiell känslighet.
Diagnostisk algoritm (CDC/WHO)
- Presumtiv: DFA-positivt + klinisk/epidemiologisk förenlighet → inled behandling + anmälan till smittskydd.
- Bekräftande: Odling (48–72h), PCR (F1-gen, pla-gen), serologi (akut/kvalescent).
- Referenslabbekräftelse: Krävs för definitiv falldefinition.
Provhantering
- Transport vid 4°C (kylkedja); frys inte.
- Processa i BSL-2 med BSL-3-praxis; Y. pestis är Tier 1 select agent.
- Meddela laboratoriet omedelbart för prioriterad hantering.
Klinisk kontext
- Endemiska områden: SW USA (AZ, CO, NM, UT), Afrika, Asien, Sydamerika.
- Riskfaktorer: gnagarexponerning, flugbett, hantering av sjuke djur, resor.
- Empirisk terapi (streptomycin, gentamicin, doxycyklin, ciprofloxacin) bör inte avvakta DFA-resultat om klinisk misstanke är hög.
DFA möjliggör snabb smittskyddsåtgärd — isolering, smittspårning, miljöutredning — medan bekräftande tester pågår.
