Protokoll för transfektion av GFP

Användningen av grönt fluorescerande protein revolutione molekylär-och cellbiologi , det får forskare att visualisera celler och proteiner på ett sätt som aldrig tidigare varit möjliga . Dess inverkan på vetenskaplig forskning var så djup att Osamu Shimomura under 2008 fick Nobelpriset i kemi för sin upptäckt och isolering av GFP från fluorescerande maneter . Definitioner

En gen är en sekvens av deoxiribonukleinsyra i celler som är ansvarig för produktionen av ett specifikt protein . En plasmid som är en separat del av DNA som innehåller en gen av intresse , såsom GFP . Transfektion är ett förfarande för införande av en plasmid in i celler. Addera Metoder

Transfektion involverar typiskt blandning av en DNA-plasmid innehållande en gen , såsom GFP med lipider eller salter. Celler exponerades för denna lösning , vilket skapar hål i cellmembranet , vilket tillåter plasmiden i cellen där genen kan uttryckas som protein. Kommersiella transfektion kit finns , eller reagenserna kan göras i ett laboratorium . Valet av transfektion metod beror på den typ av celler och plasmider som används. GFP visualiseras och övervakas med utrustning som känner av fluorescens .
Använder

GFP är oftast knutna till ett protein av intresse för transfektion . Nobelkommittén pekas ut spårning av " nervcellsskadorvid Alzheimers sjukdom " och " hur insulinproducerande betaceller formas i bukspottkörteln hos ett växande embryo " som exempel . Addera