Serologiska tekniker är laboratoriemetoder som immunologer använder för att påvisa antigener och antikroppar i blodserum eller plasma. Blodserum är den vätskedel av blodet som återstår efter att blodkroppar och koagulationsfaktorer har avlägsnats. En person som arbetar i ett serologilaboratorium försöker diagnostiskt identifiera antikroppar i serumet med hjälp av specialiserade tekniker. Dessa metoder används även för att fastställa en persons blodgrupp, upptäcka infektioner och identifiera främmande ämnen i blodet.
Här presenteras fyra av de vanligaste serologiska teknikerna och hur de fungerar i praktiken.
Enzymkopplad immunosorbentanalys, ofta förkortad ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay), är en biokemisk serologisk teknik som påvisar antikroppar i ett blodprov. Vid ett ELISA-test placeras antigenet för den antikropp som söks i brunnarna på en mikrotiterplatta. Därefter tillsätts serumet, utspätt till 400 gånger, i brunnarna. Om antikroppen finns i serumet binder den till antigenet som redan sitter fast på brunnarnas väggar.
Plattan tvättas sedan på ett särskilt sätt, varefter ett enzymmärkt påvisningsreagens tillsätts innan plattan tvättas igen. De bundna antikropparna kopplas till enzymer som testas för kemiska förändringar genom katalys. Den färgreaktion som enzymet ger upphov till visar vilken antikropp som finns i blodet. ELISA är idag en av de mest använda metoderna inom medicinsk diagnostik, bland annat vid testning för hiv, virusinfektioner och allergier.
Agglutination är en metod för att avgöra vilka bakteriella antigener som finns i ett serumprov. Eftersom processen verkar snabbt är agglutination en av de mest använda teknikerna inom serologin. Testet utförs genom att specifika bakterier tillsätts ett serumprov. Om serumet innehåller antikroppar som bekämpar samma bakterier kommer de aktiva antikropparna att klumpa ihop bakterierna, vilket blir synligt som en synlig aggregatbildning.
Tekniken används även för att säkerställa att en blodtransfusion är förenlig, eftersom avstötta röda blodkroppar klumpar ihop sig med antikropparna i mottagarens blod. Samma princip ligger till grund för den klassiska blodgruppsbestämningen.
Vid precipitationsmetoden tillsätts ett löst antigen till ett serumprov i ett provrör. Provröret placeras därefter i en centrifug som snurrar det, varvid centrifugalkraften pressar eventuella reagerande antikroppar mot provrörets botten. När klumparna av aktiva antikroppar hamnat i botten syns de som små fläckar utan hjälp av mikroskop. Metoden utnyttjar att antikroppar och antigener bildar olösliga komplex när de möts i rätt proportioner.
Vid komplementbindningstekniken tillsätts ett komplementprotein till antigenet och antikroppen i blodserumet. Detta är den äldsta metoden för serologisk testning och används inte längre rutinmässigt för immunitetsprov, men den har haft stor historisk betydelse inom diagnostiken.
Testet utförs genom att utspätt blodserum placeras i en mikrotiterplatta. Samma antigen tillsätts till varje prov, och en serie olika proteiner tillsätts för att ta reda på vilket protein antikroppen reagerar med och hur antigenet därmed neutraliseras. Resultatet avslöjar om personen har utvecklat antikroppar mot ett visst smittämne.
De serologiska teknikerna utgör grunden för modern medicinsk diagnostik. Medan komplementbindning främst har historiskt värde, används ELISA, agglutination och precipitationsmetoder fortfarande brett inom kliniska laboratorier över hela världen för att diagnostisera infektioner, bestämma blodgrupper och säkra blodtransfusioner.
Hälsa och Sjukdom © https://www.sjukdom.online