Elektrofores är en av de viktigaste teknikerna inom modern biokemi och molekylärbiologi. Kriminaltekniker använder metoden för att identifiera DNA-spår på brottsplatser, medan genetiska forskare utnyttjar den för att analysera och skilja olika DNA-fragment åt. Grundprincipen bygger på det faktum att DNA-molekyler är laddade partiklar – vilket gör att de kan styras och manipuleras med hjälp av elektriska fält.
En laddad partikel migrerar naturligt mot en elektrod med motsatt laddning. Eftersom proteiner är laddade partiklar kan de därför manipuleras i ett elektriskt fält. Denna grundläggande egenskap är själva grunden för all elektroforetisk separation.
Polyakrylamidgel är en polymer som används vid endimensionella elektroforesförfaranden. gelen formas i ett rör och fungerar som ett stödmedium vid rutinmässiga separationer av proteiner och nukleinsyror. Metoden är enkel, tillförlitlig och används i stor utsträckning i laboratoriemiljö världen över.
Tvådimensionell elektrofores är en mer avancerad form av proteinsparation som ofta används vid så kallad fingeravtryckning av proteiner. Tekniken utnyttjar en större yta än den endimensionella varianten och ger därmed den mest exakta proteins separationen som finns tillgänglig idag.
Koncentrationen av akrylamidgelen och dess porstorlek hänger direkt samman med molekylvikten hos de proteiner som ska separeras. Ju högre molekylvikt proteinet har, desto lägre koncentration av elektroforesgel krävs. Att välja rätt gelkoncentration är därför avgörande för ett lyckat resultat.
Vid fri flödes-elektrofores behövs inget gelmedium för att hålla proteinproverna på plats. I stället separeras de laddade proteinmolekylerna i ett fritt flytande tillstånd med hjälp av ett styrt elektriskt fält. Denna metod erbjuder kontinuerlig separation och är särskilt användbar när stora mängder prov behöver bearbetas.
Hälsa och Sjukdom © https://www.sjukdom.online