Syrafast färgning är ett laboratorieförfarande som används för att identifiera bakterier som har ett vaxartat lager på sin cellvägg och som färgas dåligt med gramfärgning – främst arter inom släktena Mycobacterium och Nocardia. Även om syrafast färgning är effektiv för att skilja dessa bakterier från syrafast-negativa bakterier räcker den inte för att differentiera mellan enskilda arter av syrafasta bakterier.
Vid syrafast färgning enligt Ziehl-Neelsen värmefixeras ett utstryksprov och färgas med karbolfuksin (en lösning av fenol och fuksin). Provets hettas upp, sköljs i vatten, avfärgas med en sur lösning och sköljs återigen. Därefter motfärgas provet med metylenblått, följd av en slutlig sköljning och torkning. När utstryket betraktas i mikroskop framstår syrafasta bakterier som röda, medan andra organismer syns som blåa.
Den modifierade Kinyoun-metoden kräver ingen uppvärmning efter den inledande färgningen, eftersom koncentrationerna av fenol och fuksin i karbolfuksinet har justerats för att öka färgningens effektivitet. Övriga arbetsmoment och reagens är desamma som i Ziehl-Neelsen-metoden.
Vid fluorokrombaserad syrafast färgning används fluorokromer som färgämne och kaliumpermanganat som motfärg. Fluorokromerna gör att syrafasta bakterier fluorescerar, medan kaliumpermanganatet skapar en mörk bakgrund som hindrar annat material och andra celler i utstryket från att fluorescera. Detta ger en hög känslighet vid mikroskopisk undersökning.
Syrafasta bakterier har mykolsyror i sin cellvägg som binder starkt till färgämnena. När bindningen väl har etablerats motstår färgämnena att avlägsnas av den sura lösningen – därav beteckningen "syrafast". Motfärgen ger sedan kontrast mellan de syrafasta bakterierna och bakgrundsmaterialet, vilket gör dem lättare att urskilja.
Flera medicinskt viktiga bakterier är syrafasta, bland annat Mycobacterium tuberculosis (som orsakar tuberkulos), Mycobacterium leprae (som orsakar lepra) och Nocardia asteroides (som orsakar nokardios). Syrafast färgning spelar därför en central roll inom klinisk diagnostik av dessa infektionssjukdomar.
Hälsa och Sjukdom © https://www.sjukdom.online