Alkalisk lys Theory

Forskare använder alkalisk lys för att extrahera plasmid-DNA från bakterier för användning i genetiska experiment . Plasmider är små cirkulära DNA-molekyler som innehåller en liten bit av den genetiska koden för studien. Varför alkalisk lys

alkalisk lys -protokollet består av en serie av lösningar som läggs till en bakteriell pellet innehållande plasmid-DNA. Den ökade alkalinitet av lösningen gör att cellerna spricker . Denna metod för utvinning skyddar plasmid-DNA medan förstöra iskt DNA och denaturera cellulära proteiner till att ge forskare med ett relativt rent prov . Addera SDS och NaOH

Alkaline beskriver två viktiga kemikalier som används för att orsaka lysering av individuella celler. Sodium dodecyl ( lauryl ) sulfat (SDS) är en detergent som destabiliseras cellen genom att skapa hål i cellmembranet . Natriumhydroxid ( NaOH ) tillägger att bryta ner cellväggen orsakar cellen att falla sönder och släppa sitt genetiska material i lösning . Addera Varför plasmid-DNA Lever

En ytterligare egenskap av NaOH i den alkaliska lys -protokollet är att avbryta vätebindning mellan DNA- baspar. Detta denaturerar iskt DNA och plasmid-DNA till enkelsträngar . Tillsats av kaliumacetat till lösningen neutraliserar alkaliniteten och den lilla plasmid-DNA är i stånd att på nytt slag och upplösas i lösningen. Genomiskt DNA är alltför stor för att åter naturen hela sin längd. Den och de denaturerade proteiner fälls ut under centrifugering lämnar plasmid-DNA i lösning . Addera