Western Blot detektionsmetoder

Eftersom antalet hiv -och aidsfall ökade i hela världen , blev avgörande behovet av exakt HIV-testning . Nu efter positiva ELISA HIV-test , vårdpersonal använder en Western blot- test för att bekräfta ett positivt hiv-infektion . Läkare diagnostisera borrelia genom Western blot test också. Testet består av intrikata detektionsmetoder : medicinska arbetare måste överföra blodprov från en gel till ett membran för att underlätta identifieringsprocessen . För att verkligen identifiera antikroppar i membranet , arbetare använda specifika enzymer, substrat och /eller flurophores . AP Enzyme

Alkaliskt fosfatas (AP ) är en av de primära enzymer i Western blot- testning. AP har en linjär reaktionstid , vilket ger en detektions fördel över andra enzymer . Ju mer tid en AP reaktion måste ske , desto mer exakt testet . Emellertid kan längre period plocka upp andra kemiska föreningar och "bakgrund" buller, som kan förvränga resultaten av testet.

HRP Enzym

sjukvårdare överväga pepparrot (HRP ) överlägsen AP , på grund av HRP : s mindre storlek , hög förvärvsfrekvens , kompatibilitet med reaktionsmembranet, pålitlighet , billig och lätt tillgängliga .

Kromogena substrat

Vårdpersonal anser kromogena substrat bäst för visning innermembranetreaktion av blod och enzym . Kromogena substrat är inte lika känsliga som andra substrat och tenderar att försvinna som blotten torkar. Men för en snabb visuell bekräftelse test, kromogena substrat göra ett verkligt val .
Kemiluminiscenta Blotting Substrat

Kemiluminiscenta läsk substrat kräver en ständig reaktion för ett lyckat test . Om enzymet upphör med verksamheten eller underlaget är slut , blir testresultatetförlorade . Emellertid i ett optimalt test, blir tillgänglig testresultatet i en till 24 timmar. Medicinska arbetare använder digital bildbehandling utrustning eller röntgen för att faktiskt se testresultatet , eftersom blotta ögat inte kan upptäcka det .
Flurophores
p Om sjukvårdare inte testa med enzymer och deras substrat , då de använder flurophore - konjugerade antikroppar . Den flurophore testet kräver färre steg men behöver specialutrustning . Testet kräver en exciteringsljuskällan, vilket gör att korrekt reaktion hos membranet. Flurophores och belysningsutrustning är dyra , men sjukvårdsarbetarehar nytta av att använda flera flurophores i samma experiment . Addera