Hur varierar mängden BAPNA-smältning med tiden?

Nedbrytningen av BAPNA (bensoyl-DL-arginin-p-nitroanilid) av trypsin följer typisk Michaelis-Menten enzymkinetik. Matsmältningshastigheten ökar med tiden initialt när fler enzymmolekyler blir engagerade i reaktionen. Men eftersom substratkoncentrationen minskar med tiden saktar nedbrytningshastigheten ner. Förhållandet mellan mängden BAPNA som smälts och tiden kan beskrivas med följande ekvation:

[BAPNA]t =[BAPNA]0 - k[E][BAPNA]0*t

Där:

- [BAPNA]t:Mängden BAPNA som smälts vid tidpunkten t

- [BAPNA]0:Initial koncentration av BAPNA

- k:Hastighetskonstant för reaktionen

- [E]:Koncentration av trypsin

- t:Tid

Plottet av [BAPNA]t mot t visar vanligtvis en hyperbolisk kurva. Kurvans initiala linjära fas representerar den period då reaktionshastigheten är konstant och proportionell mot enzymkoncentrationen. När reaktionen fortskrider planar kurvan ut på grund av substratutarmning och den minskande rötningshastigheten.

Genom att mäta reaktionens initiala hastighet (Vo) och bestämma Michaelis-Menten-konstanten (Km) genom grafisk analys (t.ex. Lineweaver-Burk eller Hanes-Woolf plots), är det möjligt att karakterisera enzymkinetiken och få insikter i katalytiken effektivitet och substrataffinitet hos trypsin för BAPNA.