Det första steget i direkta bakteriella färgningsförfarandenär utarbetandet av ett cellprov . Celler från en kultur eller prov är spridda i en tunn film över ett mikroskopobjektglas , torkades och fixerades med användning av värme eller ett kemiskt fixativ. Fastställande av smear fäster bakterierna till bilden och hindrar dem från att spolas bort under färgningsproceduren . Utstryk bör vara tillräckligt tunn för att medge observation av enskilda celler och fast tillräckligt för att tillåta upprepade tvättningar under färgningsproceduren .
Stains
På grund av deras höga vatteninnehåll, mikrober är nästan färglös. Färgning förstärker dem och avslöjar deras olika egenskaper . Fläckar är i allmänhet salter som består av laddade partiklar som kallas joner . Vid blandning med vatten, dissocierar ett salt till positivt laddade katjoner och negativt laddade anjoner. Fläckar är salter i vilka antingen katjoner eller anjoner är färgade . Beroende på vilken typ av jon bär färgen , vanliga mikrobiologiska fläckar är antingen basiska eller sura . Grundläggande fläckar innehåller färgade katjoner och färglösa anjoner . Exempel på grundläggande fläckar inkluderar metylenblått , grundläggande fuchsin och kristallviolett . Sura fläckar har färgade anjoner och färglösa katjoner . Exempel är eosin , kongorött och nigrosin .
Princip
Bakterier bär en lätt negativ nettoladdning . Följaktligen , de locka och binda positivt laddade grundläggande fläckar . Eftersom bakterierna själva behålla färgämnet, är processen en direkt färgningsmetod . En direkt fläck kan vara antingen enkel -eller differential . Enkel färgning använder en färg för att avslöja storlek, form och placering av bakterier . En differential fläck , såsom Gram-färgning , använder två olika färgade basiska färgämnen att särskilja olika typer av bakterier förutom sina fysiska egenskaper. Indirekta eller negativa färgningsteknik använder sura fläckar . Bakterierna repellera färgämnet och förbli färglös mot fläcken bibehållande bakgrund.
Fördelar
Direkt infärgning av bakteriella celler är den mest använda tekniken för att visualisera bakterier. Det är billigt , enkelt och relativt snabbt. Denna teknik ger vårdpersonal med samma dag resultat , en potentiellt livräddande fördel vid diagnostisering och behandling av vissa infektioner, såsom bakteriell hjärnhinneinflammation . Direkt utstryksprover är permanenta preparat som kan granskas på nytt vid ett senare tillfälle , om så är nödvändigt . Eftersom direkt färgning dödar bakterierna , är risken för smitta från hantering av smear reducerade . Addera
Upphovsrätt © Hälsa och Sjukdom