En standardkurva genererad med E. coli odlad i TSB (Tryptic Soy Bouillon) är INTE giltig för kvantifiering av E. coli i Näringsbouillon (NB).
Varför medium betyder något för kvantifiering
- Olika sammansättning: TSB (rik: kasein/sojapeptoner, dextros) vs. NB (enklare: pepton, köttsextrakt)
- Tillväxtkinetik skiljer sig: Lagfas, dubblingstid, max densitet varierar med medium
- Cellfysiologi skiljer sig: Storlek, brytningsindex, pigmentproduktion påverkar OD₆₀₀
- Metabolisk aktivitet varierar: Påverkar fluorescens/ATP-baserade analyser
Konsekvenser av cross-media-användning
- Felaktiga CFU/mL uppskattningar
- Systematisk över- eller underestimerings
- Ogiltiga statistiska jämförelser
- Icke-reproducerbara resultat
Korrekta praxis
- Generera standardkurva i exakt samma medium som experimentella odlingar
- Matcha inkubationsförhållanden (temp, skakning, tid)
- Inkludera medium-blaanks
- Validera linjäritetsintervall för varje medium
Mediespecifika standardkurvor är avgörande för korrekt bakteriekvantifiering. Extrapolera aldrig över media.
