1. Hem
  2. Alternativ medicin
  3. Bett och stick
  4. Cancer
  5. Sjukdomar och behandlingar
  6. Tandhälsa
  7. Kost och näring
  8. Familjehälsa
  9. Hälso- och sjukvårdsbranschen
  10. Psykisk hälsa
  11. Folkhälsa och säkerhet
  12. Kirurgi och ingrepp
  13. Hälsa

Odling av Clostridium perfringens: Tillväxtkrav, medier & säkerhetsprotokoll

Clostridium perfringens är en Gram-positiv, anaerob, sporbildande basill — en ledande orsak till livsmedelsfordon sjukdom (enterotoxin typ A) och gasbrand. Laboratorieodling kräver strikta anaeroba tekniker.

Tillväxtkrav

ParameterOptimalt intervallAnteckningar
AtmosfärStrikt anaerob (<0,5% O2)Anerob kammare, GasPak-burkar, anaeroba påsar, prereducerade medier
Temperatur37°C (optimalt); intervall 15–50°CSnabb tillväxt: fördubblingstid ~8–10 min vid 37°C
pH6,0–7,5 (optimalt 6,5–7,0)Syraproduktion sänker pH; buffring viktig
Gasmix10% CO2, 90% N2 (eller 85% N2, 10% CO2, 5% H2)H2 för katalytisk O2-borttagning i kammare
Inkuberingstid18–24 timmar för kolonier; 48h för sporuleringSnabb växare — kolonier 2–4 mm vid 24h

Odlingsmedier

Berikade icke-selektiva

  • Hjärna Hjärta Infusion (BHI) Bouillon/Agar: Rikt, stödjer robust tillväxt
  • Köttmedium (RCM): Klassisk för anaerobier; heme, reducerande ämnen; visar stormig fermentering (gas)
  • Hackat Kött Glukos Bouillon: Alternativt reducerande medium

Selektiva/Differentierande

  • Tryptose Sulfat Cykloserin (TSC) Agar: Selektiv för C. perfringens; svarta kolonier (H2S + sulfitreduktion)
  • Shahidi-Ferguson Perfringens Agar (SFP): Selektiv; svarta kolonier med opak halo (lecithinas)
  • Äggula Agar (Nagler): Upptäcker lecithinas (alfa-toxin) — opak halo

Identifieringsarbetsflöde

  1. Gramfärgning: Gram-positiva stavar, subterminala sporer (utbuktande)
  2. Anerob tillväxt på BHI + aerob ingen tillväxt (obligat anaerob bekräftelse)
  3. Stormig fermentering i RCM (gasbubblor i kött)
  4. Lecithinas + på äggula agar
  5. Nagler-reaktion: antitoxin neutraliserar halo
  6. Snabb: Omvänd CAMP-test (C. perfringens + Grupp B Strep → förstärkt hemolys)
  7. Toxintypning (A-F): PCR för cpa, cpb, etx, iap, netB gener

Kritiska säkerhetsförsiktighetsåtgärder

  • BSL-2 Rutiner: Labbkittel, handskar, ögonskydd; BSC för aerosolgenererande procedurer
  • Sporrisk: Sporer motståndskraftiga mot värme (75°C × 10 min), etanol, många desinfektionsmedel. Använd 10% bleach (0,5% hypoklorit) eller sporicida medel.
  • Toxinrisk: Enterotoxin (typ A) värmelabil (60°C × 10 min); men odlingar kan innehålla sporer
  • Avfall: Autoklav 121°C × 30 min innan avhändering
  • Ingen luktsökning: Karaktäristisk "stormig" doft men aerosolrisk

Kvalitetskontroll

  • ATCC 13124 (typ A) eller 3624 som positiva kontroller
  • Aerob kontrollplatta (ska visa ingen tillväxt)
  • Mediumsterilitetskontroller

Strikt anaerob teknik och spormedvetenhet är icke-förhandlingsbara för säker, pålitlig C. perfringens odling.

Hälsa och Sjukdom © https://www.sjukdom.online