PBMC Protocol

Kryokonserverade perifera mononukleära blodceller( PBMC ) är en vanlig källa till prover för forskning som inkluderar immunterapi och reaktioner på vacciner . Medan vissa protokoll är begränsade till isolering och frys faser , andra inkluderar upptining förfaranden . Isolering Förfarande och Frys Procedure

En kommersiell förening för att främja separation placeras i varje 50 ml centrifugrör och rören centrifugeras i trettio sekunder . Caps av blodrörenbesprutas med alkohol före öppning , då antikoagulantia behandlat helblod överförs sedan via pipett i centrifugrör . Plasma skiktet hos blodet sugs med en pipett. Addera Frysning

Cellerna från det föregående steget kommer sedan centrifugeras med saltlösning tre gånger. Efter ett celltal , kommer proverna centrifugeras sedan suspenderas i frysmedium . Prover i frysmedium är nästa delas mellan cryovials i en ml mängder . Flaskor lagras över natten i en

-70 ° C frys och flyttade till långsiktig lagring i flytande kväve nästa dag . Addera Safe Upptining

cryovials överförs från flytande kväve i ett 37 ° C vattenbad och provet fick tina en till två minuter. En varm transportmedierläggs till varje flaska . Utspädd Cellsuspensionen centrifugeras under sju minuter. Antalet och cellviabiliteten kontrolleras , Om celler behöver koncentrera sig, är proverna centrifug sju minuter . Provet späds till arbetslösning och vilade efter tolv till arton timmar innan undersökningen i det angivna protokollet . Addera